更新时间:2024-06-14
惭翱颁1细胞系在使用中,可增加到2ml IMDM和2ml冷冻培养基,以储存在4个小瓶中。此外,最好在冷冻细胞 前计数细胞并记录在小瓶上。
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基本信息
细胞名称 :惭翱颁1细胞系
T150烧瓶 :07-200-64
T75烧瓶 :10-126-37
冷 冻 剂 :03-374-059
45um过滤器 :09-754-21
惰性谱线 :MOC1,22
侵略性线 :MOC2
IMDM :sh30228.02 Hams
营养混合物F10-F12 :sh30026.01胎牛血清,特征-海克隆
目录 / 批次号 :sh30071.03 / AWK24001
过滤1L过滤器瓶的过滤器 :09-761-108
科学试剂目录编号 胰岛素:I6634-50mg
EMD微孔试剂目录编号 :表皮生长因子(EGF),重组人:01-107
惭翱颁1细胞系
解冻细胞系
1. 在解冻前,将21ml IMDM MOC线培养基加入到T150中(如果想解冻成T75,则将10ml加入到T75 中)2. 将液氮从冷冻瓶中取出,喷上含有70%酒精的小瓶进行清洗。
3.将冷冻瓶的下半部分放在37摄氏度的水浴中(不让盖子接触水,以避免污染),直到 有一小块冰漂浮着。
4.再次用ETOH喷洒冷冻瓶,然后放在引擎盖上。将1ml培养液移液管加入到1ml细胞中,并将这 些2ml加入到已经含有培养基的T150中(使一个T150总共有22ml)。
5.在T150烧瓶中取一些培养基,冲洗冷冻瓶,然后平板放置,以确保所有残留的细胞都留在冷 冻瓶中。
冷冻细胞系
1. 从T150中收集细胞
2. 在15ml锥形管中旋转成颗粒(1000 RPM x5分钟)
3. 排出上清液
4. 点击15ml圆锥形管,重悬细胞
5. 加入1.5ml IMDM MOC系培养基,在培养基中重建细胞-保持冰上
6. 管入冰时缓慢加入1.5 ml冷冻介质(在IMDM MOC线介质中制作冷冻介质-20%DMSO。例:20ml库存-加入16ml IMDM MOC线培养 基和4ml DMSO。注射器过滤器,使用um过滤器
7. 每份1毫升到3个冷冻瓶
8. 在-80摄氏度内储存不超过2周
9. 在1-2周内放入液氮溶液中
注:如果需要,可增加到2ml IMDM和2ml冷冻培养基,以储存在4个小瓶中。此外,最好在冷冻细胞 前计数细胞并记录在小瓶上。